Al manipular microorganismos, es importante utilizar correctamente una técnica aséptica, tanto para evitar que sus microorganismos se contaminen por fuerzas externas como para protegerse a sí mismo y a las personas que lo rodean.
Pasos
Paso 1. Protéjase
Átese el cabello largo y use una bata de laboratorio y gafas protectoras.
Paso 2. Lávese las manos y lave su espacio de trabajo
Lávese las manos con agua y jabón y rocíe el banco con etanol al 70%.
Paso 3. Diseñe todo su equipo
Asegúrese de tener todo listo antes de comenzar.
Paso 4. Encienda el mechero Bunsen lo más alto posible
Lo necesitará para esterilizar su equipo, y el tiro hacia arriba evita que los contaminantes externos caigan en su cultivo.
Gire el collar para que el flujo de aire esté completamente abierto
Paso 5. Esterilice el asa de inoculación
Sosténgalo en un ángulo de aproximadamente 45 ° hacia abajo y muévalo lentamente a través de la llama para que brille al rojo vivo.
- Es más fácil sujetar el lazo entre el pulgar y el dedo índice y sujetarlo con el dedo medio.
- La parte más caliente de la llama está justo en la punta del cono de fuego azul interno.
Paso 6. Use su otra mano para agarrar su cultura original
- Si es un plato, sosténgalo y abra la tapa con la manivela lo suficiente para que el lazo entre.
- Si es un tubo con tapa, use el dedo meñique de la mano con la que sostiene el lazo de inoculación para quitar la tapa, luego arrastre rápidamente la abertura del tubo a través de la llama del mechero Bunsen dos veces. Esto se llama flamear y mata cualquier cosa que quiera ingresar al tubo, y crea una corriente de convección que fuerza el aire a salir del tubo para que nada pueda entrar. Sigue sujetando la tapa con el meñique para el siguiente paso.
Paso 7. Inocular
Toque el bucle de inoculación a una colonia que desee recoger. Si está inoculando con caldo líquido, sumerja el asa de inoculación en el tubo y agite el asa para asegurarse de obtener suficientes bacterias.
Paso 8. Cierre el cultivo original
Si es un plato, simplemente cierre la tapa y vuelva a colocarlo. Si es un tubo, arrastre la abertura a través de la llama del mechero Bunsen dos veces, luego vuelva a colocar la tapa.
Paso 9. Abra la placa nueva
Como antes, use su mano libre para abrir la tapa lo suficiente para que el lazo entre
Paso 10. Coloque las bacterias en la placa
Pase suavemente el asa de inoculación sobre la superficie, teniendo cuidado de no penetrar el agar.
Un patrón de rayas común es el método de cuadrante
Paso 11. Cierre la placa
Paso 12. Esterilice el asa de inoculación
Como antes, sosténgalo en un ángulo de 45 ° hacia abajo y muévalo lentamente a través de la llama para que se ponga al rojo vivo.
Consejos
- En general, los guantes no son necesarios. Todos los pasos anteriores sirven para protegerse tanto a usted como a sus bacterias, por lo que el riesgo de contaminación es muy bajo. Los guantes pueden provocar quemaduras desagradables si accidentalmente los toca con el lazo de inoculación caliente.
- Tenga en cuenta que está trabajando con fuego. No es gran cosa, solo asegúrese de saber qué hacer si se quema; pause el experimento, enjuague la quemadura con agua y, si es necesario, notifique a su supervisor.
- Si está haciendo varias carreras de tener que usar una técnica aséptica, no es necesario apagar completamente el mechero Bunsen entre corridas, simplemente apáguelo a la llama piloto y apáguelo solo cuando haya terminado por completo.
